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          阿拉丁細胞裂解液選型與配制

          來源: 上海阿拉丁生化科技股份有限公司   2020-12-14   訪問量:910評論(0)


          阿拉丁細胞裂解液選型與配制

          細胞裂解液是以去污劑為基礎、針對細胞裂解應用、成分優化的緩沖液和試劑。對于不同細胞類型、蛋白定位、以及下游應用,需要不同的細胞裂解液進行有效的細胞裂解和蛋白提取。

          去污劑主要類型及其作用

          根據去污劑類型、蛋白定位、及目的蛋白性質來確定細胞裂解液的種類。

          去污劑主要類型及其作用

          類型帶電情況作用應用舉例
          離子型
          (變性去污劑)
          帶電荷的
          陰離子性或陽離子性的
          破壞蛋白活性、功能及蛋白間相互作用力總蛋白提取
          SDS-PAGE
          SDS
          ETMAB
          非離子型
          (非變性去污劑)
          不帶電荷較少破壞活性及功能,可維持蛋白間作用力酶學檢測
          免疫檢測
          Triton X-100
          Tween 20
          NP-40
          兩性離子型具有正電荷和負電荷的基團
          但凈電荷為零
          兼具離子型和非離子型去污劑的特點,能破壞蛋白質間相互作用 CHAPS
          CHAPSO

          根據蛋白定位不同推薦的裂解液種類

          蛋白定位
          全細胞
          細胞質
          (可溶性蛋白)
          細胞質
          (細胞骨架等不溶性蛋白)
          細胞膜
          細胞核
          線粒體
          裂解液種類
          NP-40或RIPA
          Tris-HCl
          Tris-Triton
          NP-40或RIPA
          RIPA
          RIPA

          常用細胞裂解液

          #RIPA緩沖液

          最初以其開發的測定方法(放射免疫沉淀測定法)來命名,是兩種離子去污劑和一種非離子去污劑的Tris緩沖液,也是哺乳動物細胞或軟組織裂解和蛋白提取的常用選擇。

          常用配方:

          25 mM Tris-HCl, pH 7.6

          150 mM NaCl

          1% NP-40

          1%去氧膽酸鈉

          0.1%十二烷基硫酸鈉(SDS)

          兼容應用:

          BCA及去污劑兼容型的Bradford試劑蛋白濃度測定、SDS-PAGE、蛋白質免疫印跡、ELISA及純化等。

          #IP緩沖液

          是一種修飾型的RIPA緩沖液(不含SDS),可有效溶解細胞蛋白,但無法釋放基因組DNA或破壞蛋白復合物,可兼容下游的免疫沉淀或者親和吸附的應用。

          常用配方:

          25 mM Tris-HCl, pH 7.4

          150 mM NaCl

          1% NP-40

          1% mM EDTA

          5% 甘油

          兼容應用:

          BCA及去污劑兼容型Bradford試劑蛋白濃度測定、蛋白質免疫印跡、ELISA、免疫沉淀及報告基因檢測。

          #NP-40緩沖液

          NP-40是一種非離子型聚氧乙烯表面活性劑,常作為細胞裂解緩沖液或其他用于提取和溶解蛋白質的溶液的組分。

          常用配方:

          150mM NaCl

          1.0% NP-40

          50mM Tris-HCl,pH值8.0

          兼容應用:

          BCA及去污劑兼容型Bradford試劑蛋白濃度測定、蛋白質免疫印跡、ELISA、免疫沉淀。

          #Tris-Triton緩沖液

          非離子型表面活性劑,常用作細胞裂解緩沖液或其他用于提取和溶解蛋白質的溶液。Trition X-100效果介于NP-40和SDS之間。

          常用配方:

          10mM 三羥甲基氨基甲烷(Tris),pH值7.4

          100mM NaCl

          1mM EDTA

          1mM EGTA

          1% Triton X-100

          10% 甘油

          0.1% SDS

          0.5% 去氧膽酸鈉

          兼容應用:

          BCA及去污劑兼容型Bradford試劑蛋白濃度測定、蛋白質免疫印跡、ELISA、免疫沉淀。

          產品列表

          產品號產品名稱規格Cas包裝
          C111538 氯化鈉用于細胞和昆蟲細胞培養,≥99.5%(T)7647-14-5500g,2.5kg
          N105507NP-40~10% in H2O9016-45-9 25ml,100ml,
          500ml,5L
          T109026 Triton X-100生化試劑級9002-93-1100ml,500ml,1L,4L
          T105291三(羥甲基)氨基甲烷鹽酸鹽(Tris HCl)用于分子生物學和細胞培養,≥99.0%(AT)1185-53-1100g,500g
          S104198脫氧膽酸鈉98%302-95-425g,100g,
          250g,500g
          S118591十二烷基硫酸鈉(SDS)分子生物學級,≥98.5% (GC)151-21-3 25g,100g,
          500g
          T110602三(羥甲基)氨基甲烷(Tris)細胞培養級,≥99.9%(T)77-86-15kg
          E112489乙二胺四乙酸(EDTA)99%,用于細胞培養60-00-4100g,500g
          E1044343,6-二氧雜-1,8-辛二胺四乙酸(EGTA)用于分子生物學,≥99.0%67-42-5 25g,100g,
          500g
          G118851甘油無菌,for molecular biology, ≥99%56-81-5100ml



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